1. Haeba ke amohela tube ea lisele tse leqhoa, na nka e kenya ka ho toba ka har'a metsi a naetrojene bakeng sa polokelo?
Maemong a mangata, lisele tse tsamaisoang holim'a leqhoa le omileng (-80 ° C) li ka khutlisetsoa ho naetrojene e metsi 'me ea qhibiliha kapele ka mor'a moo.Leha ho le joalo, ho sebetsa ha lisele ho ka fokotseha ka mor'a phekolo e joalo.Bakeng sa mela e meng e hlokolosi ea lisele, sena se ka etsa hore ho hlaphoheloa ha lisele ho be thata le ho feta.Ho nahanoa hore ketsahalo ena e bakoa ke phetoho ea sebōpeho sa likristale tsa leqhoa ka har'a lisele ka lebaka la phetoho ea mocheso.Ka hona ho kgothaletswa hore lisele li lokela ho qhibiliha le ho hlahisoa ka potlako ka mor'a hore li fumanehe.Fokotsa nako ea polokelo ho -80°C.Mocheso ona o sebelisoa feela bakeng sa ho tsamaisa.
2. Ke mehato efe ea tšireletso e lokelang ho nkoa ha ho tlosoa lisele ho tloha ho naetrojene e metsi bakeng sa ho hlaphoheloa?
Li-cell cryotube tsa naetrojene e metsi tse sa koalehang ka ho feletseng 'me tse nang le naetrojene e metsi e kenang ho tsona li ka baka ho phatloha haeba mocheso oa cryotube o phahama haholo ha o qhibiliha.Ka hona ho khothaletsoa hore li-goggles le liatlana tse sireletsang li apesoe ha ho tlosoa lisele ho tsoa ho naetrojene ea metsi.Bakeng sa ho tsosolosa, tube ea leqhoa e lokela ho sisinngoa ka ho tsoelang pele ka bateng ea metsi ea 37 ° C ho qhibiliha ka ho feletseng tharollo ea leqhoa nakong ea metsotso e 1-2.Ka mor'a moo, hlakola bokantle ba tube ka ho hlakola joala, ebe u e kenya tafoleng e hloekileng haholo ebe u fetisetsa lisele ho tube ea centrifuge e nang le 10 ml ea setso sa setso, centrifuge ka 1000 rpm bakeng sa metsotso e 5-10, lahla e matla haholo, eketsa tekanyo e loketseng ea setso 'me u ente botlolo ea setso 'me u e kenye ka har'a incubator ea CO2 ea 5%.
3. Ke hobane'ng ha lisele li lokela ho bolokoa karolong ea mouoane ea tanka ea metsi ea naetrojene ho e-na le mohato oa mokelikeli?
Lisele tse bolokiloeng mokhahlelong oa khase oa naetrojene ea metsi li na le monyetla oa ho tsosolosoa.Leha mokhahlelong oa mokelikeli oa naetrojene ea metsi, haeba li-tubes tsa lyophilisation li sa koaloa hantle kapa li na le ho lutla, ho kopana ka kotloloho lipakeng tsa lisele le naetrojene ea metsi ho ka senya ts'ebetso ea lisele kamora ho qhibiliha.
4. Bakeng sa lisele tse emisitsoeng, ke fetola mokhoa oa setso joang?
Ho lema lisele tse emisitsoeng ho ka etsoa ka ho eketsa mokhoa o mocha (haeba sebaka se lumella) kapa ka ho arola lisele ho tloha bohareng ba khale ka centrifugation (100 xg bakeng sa metsotso e 5) 'me ka mor'a moo ho khutlise lisele tse omeletseng ka mokhoa o hloekileng.Leha ho le joalo, bakeng sa mela e mengata ea lisele tse emisitsoeng, ho kenyelletsa feela seaplane ke mokhoa o betere.Ka tsela efe kapa efe, sehare se hloka ho nchafatsoa pele lisele li fihla boima ba tsona bo boholo ka ho fetesisa.Boima ba lisele tsa saturation bo fapana pakeng tsa 3 x 10 5 le 2 x 10 6 ho itšetlehile ka mohala oa sele le maemo a setso (ho phomola kapa ho susumetsa, maemo a oksijene, joalo-joalo).Lisele li tlameha ho hlapolloa hore li be maemong a tlase a lisele ho lumella ho hlaphoheloa ho lekaneng ha limatlafatsi ho boloka lisele li hola ka mokhoa oa logarithmically.Haeba sehare se fetoloa feela ntle le ho fokotsa boima ba lisele, lisele li tla senya sehare ka potlako ebe lia shoa.Haeba lisele li hlapolotsoe ka tlas'a boima ba tsona bo fokolang ka ho fetisisa, li tla kena karolong ea lag mme li hole butle haholo kapa li tla shoa.Mohala o mong le o mong oa sele o fanyehiloeng o na le boholo bo fapaneng ba saturation le nako ea ho feta, kahoo lipalo tsa lisele tsa letsatsi le letsatsi ke mokhoa oa ho beha leihlo mela e emisitsoeng ea lisele*.
5. Boemo ba CO2 bo khothalelitsoeng bakeng sa setso sa lisele ke bofe?
Le hoja maemo a CO2 litsamaisong tsa setso sa lisele ho tloha ho 0.03% ho isa ho 40% (hangata ho pota 0.03% CO2 sepakapakeng), ho tloaelehile haholo ho se be le CO2 e kentsoeng moeeng kapa khatello ea CO2 ea 5% ho isa ho 10%.Ho bohlokoa ho lokisa bongata ba sodium bicarbonate bohareng ho leka-lekana le boemo ba CO2 mokhahlelong oa khase.Lisele li hlahisa CO2 'me li hloka tekanyo e nyenyane ea carbonic acid bakeng sa ho hōla le ho phela.Haeba ho se na CO2 e eketsoang 'me lisele li ntse li ata, 4 mM (0.34 g/L) ea anhydrous sodium bicarbonate e ka sebelisoa.Leha ho le joalo, sekoahelo sa botlolo ea setso se lokela ho tiisoa ka nako ena.Haeba tsamaiso ea setso e hloka 5% kapa 10% CO2, sebelisa 23.5 mM (1.97 g/L) kapa 47 mM (3.95 g/L) sodium bicarbonate ho 37°C, ka ho latellana, ka pH ea pele e ka bang 7.6.Tlas'a maemo ana, botlolo e lokela ho tloheloa e sa koaheloa kapa sejana sa Petri se sebelisoe ho boloka tekano ea khase.
6. Ke hobane'ng ha lisele tse ling li hloka sodium pyruvate?Ke lokela ho eketsa sodium pyruvate e kae ho seaplane?
Pyruvate ke organic acid metabolite tseleng ea glycolytic * e kenang habonolo le ho tsoa sele.Ka hona, ho eketsoa ha sodium pyruvate ho ea bohareng ho fana ka mohloli oa matla le mohloli oa carbon bakeng sa anabolism, ho thusa ho boloka lisele tse itseng tse khethehileng, ho thusa ka ho kopanya lisele kapa ho hlokahala ha likhahla tsa serum li fokotseha.Sodium pyruvate e boetse e thusa ho fokotsa cytotoxicity e bakoang ke fluorescence.Sodium pyruvate hangata e eketsoa sebakeng sa ho qetela sa 1 mM.Litharollo tsa sodium pyruvate tse fumanehang khoebong hangata ke tharollo ea polokelo ea 100 mM (100X).
E fetoletsoe ka www.DeepL.com/Translator (mofuta oa mahala).
Nako ea poso: Jun-21-2022